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篤瑪 犬去甲腎上腺素(NA/NE) ELISA 試劑盒 產(chǎn)品介紹

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  • 品  牌:
  • DM
  • 主要規(guī)格:
  • 96T/48T
  • 用  途:
  • 科研
    • 犬去甲腎上腺素(NA/NE) ELISA 試劑盒 試劑盒性能 1. 準(zhǔn)確性:標(biāo)準(zhǔn)品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值,大于等于0.9900。 2. 靈敏度:最低檢測(cè)濃度小于1.0 pg/mL。 3. 特異性:不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。 4. 重復(fù)性:板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于15%。 5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。 6. 有效期:6個(gè)月 犬去甲腎上腺素(NA/NE) ELISA 試劑盒 操作步驟 1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。 2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL; 3. 樣本孔先加待測(cè)樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL;空白孔不加。 4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。 5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。 6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。 7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。 犬去甲腎上腺素(NA/NE) ELISA 試劑盒 ELISA 實(shí)驗(yàn)步驟: 1.包被抗原:稀釋液pH 9.6 碳酸鹽緩沖液,多肽濃度2ug/ml,0.1ml/孔,4oC過(guò)夜,洗凈。 2.1%BSA (pH 9.6 碳酸鹽緩沖液) 封閉,0.1ml/孔,37oC1h,洗凈。 3.稀釋抗血清(可稀釋不同濃度) 0.1ml/孔,37oC 30分鐘,洗凈。 4.稀釋辣根過(guò)氧化物每標(biāo)記的二抗0.1ml/孔,37oC 40分鐘,洗凈。 5.顯色:TMB顯色 A液:四甲基聯(lián)苯胺10mg 溶于DMF1ml中,再用pH5.0檸檬酸緩沖液稀釋100倍. B液:5ul加蒸餾水12.5ml 。 終止液:2N硫酸 A液、B液各一滴,比光顯色10分鐘,終止液一滴。 6.450nm 波長(zhǎng)測(cè)OD值 犬去甲腎上腺素(NA/NE) ELISA 試劑盒 酶聯(lián)免疫試驗(yàn)步驟 將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出,置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時(shí)可能會(huì)有結(jié)晶需恢復(fù)到室溫以充分溶解,每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的微孔板及框架,將不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。 編 號(hào):將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。 加樣反應(yīng):加標(biāo)準(zhǔn)品或樣本50μl/孔到各自的微孔中,然后加酶標(biāo)記物50μl/孔,再加入50μl/孔的抗體工作液,用蓋板膜封板,輕輕振蕩5秒混勻,25℃反應(yīng)30分鐘。 洗 滌:小心揭開(kāi)蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,用工作洗滌液250μl/孔充分洗滌5次,每次間隔30秒,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。 顯 色:每孔加入底物液A 50μl,再加底物液B 50μl,輕輕振蕩5秒混勻,25℃避光顯色15分鐘(若藍(lán)色過(guò)淺,可適當(dāng)延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間)。 終 止:每孔加入終止液50μl,輕輕振蕩混勻,終止反應(yīng)。 測(cè)吸光值:用酶標(biāo)儀于450nm處測(cè)定每孔吸光度值(建議用雙波長(zhǎng)450/630nm)。測(cè)定應(yīng)在終止反應(yīng)后10分鐘內(nèi)完成。

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