檢測(cè)認(rèn)證人脈交流通訊錄
篤瑪 凍干羊抗人C3D血清 產(chǎn)品價(jià)格
- 凍干羊抗人C3D血清
標(biāo)本要求
1. 血清:
室溫血液自然凝固10-20 分鐘后,離心20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保
存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20 分鐘后,離心20
分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成應(yīng)再次離心。
3.尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀
形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4.細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
5.培養(yǎng)細(xì)胞:
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100 萬(wàn)/ml 左右。
通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20 分鐘左
右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
6.組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化
后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻
漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20 分鐘左右(2000-3000 轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢
測(cè),其余冷凍備用。
7.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)
行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
8.不能檢測(cè)含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
凍干羊抗人C3D血清
應(yīng)用范圍:
酶標(biāo)試劑、免疫比濁試劑、免疫膠乳試劑生產(chǎn)、提取純化抗體、組化實(shí)驗(yàn)中
對(duì)應(yīng)抗原,或封閉對(duì)應(yīng)雜抗體,測(cè)定對(duì)應(yīng)抗原濃度,或抗原夾芯法測(cè)定對(duì)應(yīng)
抗體,吸收雜抗原成分,層析純化抗原,分析與鑒定對(duì)應(yīng)抗原成分,封閉交
叉抗原,測(cè)定對(duì)應(yīng)抗原成分,測(cè)定抗原純度等。
1.液體抗血清保存原則:避免反復(fù)凍融
2.短期保存的抗血清:如幾周內(nèi)就會(huì)使用,收到后推薦在 2-8℃保存,2-8℃短暫保存
數(shù)周對(duì)活性沒(méi)有影響。
3.長(zhǎng)期保存的抗體:如抗體需超過(guò) 1 個(gè)月后才會(huì)使用,請(qǐng)酌情分裝后于-20℃保存。
凍干羊抗人C3D血清
操作步驟
試管法(改良 Mayer 法)
1、致敏羊紅細(xì)胞: 2%綿羊紅細(xì)胞加等量稀釋后的溶血素( 1:2000),混勻,置 37℃水浴 30min。
2、稀釋血清:待測(cè)血清 0.2ml,加應(yīng)用液 3.8ml,稀釋度為 1:20。
3、配制溶血標(biāo)準(zhǔn)管:全溶血管:2%綿羊紅細(xì)胞 2ml 加 8ml 蒸餾水,混勻。
50%溶血管:取全溶血管液 2ml 加緩沖液 2ml。
4、按表所示,依次加各成分于試管中,混勻,置 37℃水浴 30min, 第 10 管為非溶血對(duì)照:補(bǔ)體 CH50 測(cè)定試管法
5、結(jié)果測(cè)定:取出試管, 2000r/min 離心 10min,對(duì)照管應(yīng)不溶血。肉眼比色,選與 50%溶血標(biāo)準(zhǔn)管相近二管,再用分光光度計(jì)測(cè)(波長(zhǎng) 542nm、 0.5cm 比色杯) OD 值,
確定與標(biāo)準(zhǔn)管最接近者為終點(diǎn)管,然后按下公式計(jì)算 CH50 值:
血清補(bǔ)體 CH50( U/ml) =( 1/血清用量)×稀釋度。
如第 5 管為終點(diǎn)管,測(cè)待測(cè)血清中CH50為66.7U/ml。血清補(bǔ)體CH50正常值為50-100U/ml。
上海篤瑪生物科技有限公司
楊燕燕
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