親子鑒定的依據(jù)

　　1、遺傳特征的分析

　　遺傳標記的概念(genetic marker)

　　2、妊娠期限的檢查(280±14天)

　　3、性交及生育能力的鑒定

　　親子鑒定的原理

　　方法：分析單基因遺傳特征

　　原理：所用的遺傳標記遵守孟德爾遺傳規(guī)律和終生不變。

　　判定父子關(guān)系的基本原理：

　　在肯定某個基因必須來自生父，而被控父親并不具有這個基因的情況下，可以排除親子關(guān)系；

　　在肯定某個基因必須來自生父，而被控父親具有這個基因的情況下，則不能排除其親子關(guān)系；

　　——父權(quán)概率

　　線粒體DNA多態(tài)性→母系單親的親子鑒定

　　Y染色體DNA多態(tài)性→父系單親的親子鑒定

　　基因產(chǎn)物水平的遺傳標記

　　一、紅細胞血型

　　指由等位基因決定的紅細胞表面抗原的差異，為最早用于親子鑒定的遺傳標記，有ABO、MN、P、Rh等21個血型系統(tǒng)。

　　簡單遺傳性狀，符合孟德爾遺傳規(guī)律

　　遺傳多態(tài)性，不易受年齡、性別、疾病影響

　　操作簡單、重復性好，結(jié)果明確

　　二、紅細胞酶型

　　指紅細胞多態(tài)性同工酶個體間的差異，如EAP、ESD、PGM1等

　　方法：電泳分離＋酶譜技術(shù)

　　三、血清蛋白型

　　指由等位基因決定的人血清中同一種蛋白質(zhì)的個體差異，又稱血清型，如結(jié)合珠蛋白型，維生素D結(jié)合蛋白型，α1一抗胰蛋白酶型等。

　　方法：電泳分離＋蛋白染色/免疫印跡技術(shù)。

　　四、白細胞型

　　指人類白細胞抗原(HLA)，又稱移植抗原或組織相溶性抗原系統(tǒng)，包括A、B、C、D、DR、DQ、DP等基因產(chǎn)物,具有高度遺傳多態(tài)性,是最復雜的人類遺傳標記。

　　方法：微是量淋巴細胞毒試驗；混合淋巴細胞培養(yǎng)。

　　DNA水平的遺傳標記

　　一、DNA的結(jié)構(gòu)與功能

　　二、DNA多態(tài)性的分子學基礎(chǔ)

　　(一)序列多態(tài)性

　　指在兩條同源染色體上，同源DNA序列長度相等，但個別核苷酸不同而產(chǎn)生的個體差異，也稱單核苷酸多態(tài)性(SNP)。

　　(二)長度多態(tài)性

　　指由于片段插入、缺失或重復序列數(shù)目變異所致的DNA片段長度的個體差異。

　　類型：散在重復序列

　　串聯(lián)重復序列、倒位重復序列

　　DNA多態(tài)性的檢測技術(shù)

　　(一)DNA指紋(DNA fingerprint)技術(shù)

　　將生物檢材中細胞核的DNA分離出來，用特定的限制性內(nèi)切酶消化，后經(jīng)電泳分離，Southern印跡轉(zhuǎn)移，再用已知序列小衛(wèi)星DNA探針根據(jù)堿基互補原則進行雜交，用放射自顯影等技術(shù)顯示出一系列不等距離，相互間隔的多條電泳譜帶組成的高度多態(tài)性圖譜，實質(zhì)為DNA的限制性片段長度多態(tài)性(RFLP)圖像，因各人不同(同卵雙生除外)，比對結(jié)果類似指紋，故稱DNA指紋圖譜。

　　特點：

　　(1)體細胞穩(wěn)定性

　　(2)個體高度特異性

　　(3)按孟德爾遺傳規(guī)律遺傳

　　(二)聚合酶鏈式反應(PCR)技術(shù)

　　是依賴于靶DNA序列側(cè)翼上所結(jié)合的兩個寡核苷酸引物，在體外由DNA聚合酶催化合成特異性DNA片段的方法，又稱體外基因擴增方法，目的是從生物體的整個基因組DNA中獲取足夠量的特異性片段，以供進一步分析。

　　特點：靈敏度高，特異性中，操作簡單、快速。

　　PCR產(chǎn)物的類型及作用：

　　(1)擴增片段序列多態(tài)性

　　(2)擴增片段長度多態(tài)性(AMP-FLP)

　　來自基因組DNA中小衛(wèi)星或微衛(wèi)星位點。

　　STR是應用最廣泛的遺傳標記系統(tǒng)

　　(1)基因位點多、多態(tài)性高,擴增片段短。

　　(2)擴增片段長度相差不大，利于進行多個STR位點的復合擴增。

　　(三)DNA芯片(DNA chip)技術(shù)

　　親子鑒定結(jié)果的評估

　　一、排除親權(quán)關(guān)系

　　指分析受檢者之間的遺傳標記，發(fā)現(xiàn)不遵循遺傳規(guī)律。

　　1、只有1個遺傳標記違背遺傳規(guī)律，應加測其他系統(tǒng);

　　2、有2個遺傳標記排除，應具體分析;

　　3、有3個或以上遺傳標記排除，可排除親子關(guān)系;

　　二、肯定親權(quán)關(guān)系

　　指分析遺傳標記未發(fā)現(xiàn)違背遺傳規(guī)律，可能存在親生關(guān)系；

　　根據(jù)下列指標肯定親權(quán)關(guān)系：

　　1、實驗檢測遺傳標記的累積非父排除率≥99.95%；

　　2、假定父親的累積父權(quán)指數(shù)>2000，或在前概率相同條件下，假定父親的相對父權(quán)機會≥99.95%。

　　1、只有1個遺傳標記違背遺傳規(guī)律，應加測其他系統(tǒng);

　　2、有2個遺傳標記排除，應具體分析;

　　3、有3個或以上遺傳標記排除，可排除親子關(guān)系;

　　三、單親親子鑒定結(jié)果的評估

　　指只有單親參與親子鑒定

　　方法：

　　1、根據(jù)遺傳標記是否違反遺傳規(guī)律進行排除。若無法排除親權(quán)關(guān)系，在親子鑒定的各位點的累積非父排除率>0.9990，計算其父權(quán)概率≥0.9990，可肯定親子關(guān)系。

　　2、利用不能參與一方的直系親屬(父母、兄、妹)的DNA進行鑒定。