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110027人表皮生長(zhǎng)因子（EGF）定量檢測(cè)試劑盒（ELISA）

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品　　牌：
藍(lán)圖

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出廠價(jià)：
4500

主要規(guī)格：
96T

用　　途：
僅供科研使用，定量檢測(cè)血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液中人表皮生長(zhǎng)因子（EGF）的濃度。

僅供科研使用，不得用于臨床檢驗(yàn)。人表皮生長(zhǎng)因子（EGF）定量檢測(cè)試劑盒（ELISA）說明書【產(chǎn)品名稱】通用名稱：人表皮生長(zhǎng)因子（EGF）定量檢測(cè)試劑盒（ELISA）英文名稱：Human Epidermal growth factor（EGF） ELISA KIT 【包裝規(guī)格】 48人份/盒，96人份/盒【預(yù)期用途】僅供科研使用，定量檢測(cè)血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液中人表皮生長(zhǎng)因子（EGF）的濃度。【檢驗(yàn)原理】本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。在預(yù)包被抗人表皮生長(zhǎng)因子（EGF）抗體（固相抗體）的微孔酶標(biāo)板中，加入人表皮生長(zhǎng)因子（EGF）校準(zhǔn)品和待測(cè)樣本，再加入另一株HRP標(biāo)記的抗人表皮生長(zhǎng)因子（EGF）抗體（酶標(biāo)抗體），經(jīng)過溫育與充分洗滌，去除未結(jié)合的組分，在微孔板固相表面形成固相抗體-抗原-酶標(biāo)抗體的夾心復(fù)合物。加底物A和B，底物在HRP催化下，產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物，在終止液（2M 硫酸）作用下，最終轉(zhuǎn)化為黃色，在酶標(biāo)儀上測(cè)定吸光度（OD值），吸光度（OD值）與待測(cè)樣品中人表皮生長(zhǎng)因子（EGF）的濃度正相關(guān)。擬合校準(zhǔn)品曲線，可以計(jì)算出樣本中人表皮生長(zhǎng)因子（EGF）的濃度。【主要組成成分】主要成分組分數(shù)量主要成分校準(zhǔn)品 0.5ml/管*6管抗原配制的6個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)品包被微孔板 96T 預(yù)包被固相抗體 HRP標(biāo)記抗體 6mL HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體底物液A 6mL 過氧化脲工作液底物液B 6mL TMB工作液 20×濃縮洗滌液 30mL 含0.15%Tween20的PBS 說明書 1份 -- 自封袋 1個(gè) -- 不干膠 2片 -- 校準(zhǔn)品濃度依次為：250、200、100、50、25、0 pg/ml。校準(zhǔn)品已經(jīng)通過測(cè)試，結(jié)果表明HBs抗原陰性，HIV1、HIV2和HCV抗體陰性，由于不存在一種試驗(yàn)方法能夠完全保證沒有這些物質(zhì)，本品必須按照具有潛在的感染性進(jìn)行處理，處理過程應(yīng)當(dāng)遵循通用的安全措施。需要但未提供的材料及耗材 1、酶標(biāo)儀 2、精密移液器及一次性吸頭 3、蒸餾水 4、洗瓶或者自動(dòng)洗板機(jī) 5、37℃水浴鍋或恒溫箱 6、500ml量筒 7、無(wú)粉一次性乳膠手套 8、質(zhì)控品（可從藍(lán)圖生物科技產(chǎn)品研發(fā)系統(tǒng)中選擇）【儲(chǔ)存條件及有效期】 1、2-8℃保存，切勿冷凍，有效期6個(gè)月。 2、開封使用后，包被微孔板放入帶有干燥劑的自封袋中，密閉自封袋，并將全部試劑放回2-8℃冰箱。 3、開封后，按照建議的條件保存，校準(zhǔn)品、包被微孔板和HRP標(biāo)記抗體，有效期為14天，其他成分在標(biāo)簽標(biāo)明的有效期內(nèi)是穩(wěn)定的。【適用儀器】半自動(dòng)的酶標(biāo)儀，如Thermo MK3，或者國(guó)產(chǎn)酶標(biāo)儀。【樣本要求】樣本類型和采集以下只是列出樣品采集的一般指南。所有樣本采集過程中，不得使用疊氮鈉做為防腐劑。 1、細(xì)胞培養(yǎng)上清：4000rpm條件下離心20min，去除細(xì)胞顆粒和聚合物，上清液保存在- 20℃以下，避免反復(fù)凍融。 2、血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，4000rpm條件下離心20min，小心地分離出血清，保存在- 20℃以下，避免反復(fù)凍融。 3、血漿：肝素，EDTA，或檸檬酸鈉作為抗凝劑。在4000rpm條件下，離心20分鐘取上清，血漿保存在-20℃以下，避免反復(fù)凍融。樣本保存和穩(wěn)定性樣本在2-8℃條件下，可以儲(chǔ)存72h，或者在- 20℃儲(chǔ)存6個(gè)月。樣本收集后，不是一次檢測(cè)完，請(qǐng)按一次用量分裝凍存，避免反復(fù)凍融，使用時(shí)在室溫下解凍，確保樣品均勻充分解凍。【檢驗(yàn)方法】試劑準(zhǔn)備 1、使用前，所有的組分都要至少?gòu)?fù)溫30min，確保充分復(fù)溫到室溫。 2、濃縮洗滌液：從冰箱取出的濃縮洗滌液，會(huì)有結(jié)晶產(chǎn)生，這屬于正常現(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶完全溶解。濃縮洗滌液與蒸餾水，按1:20稀釋，即1份的濃縮洗滌液，添加19份的蒸餾水。 3、底物：底物液A和B，在使用前，按1:1體積充分混合，混合后15分鐘內(nèi)使用。操作程序 1、所有試劑和組分都先恢復(fù)到室溫，標(biāo)準(zhǔn)品、質(zhì)控品和樣品，建議做復(fù)孔。 2、按前面試劑準(zhǔn)備中描述的方法，配制好試劑盒各種組分的工作液。 3、從鋁箔袋中取出所需板條，剩余的板條用自封袋密封放回冰箱。 4、設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL，樣本孔加待測(cè)樣本50μL，空白孔不加。 5、除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL。 6、用封板膜蓋住反應(yīng)板，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。 7、揭開封板膜，棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置20s，甩去洗滌液，吸水紙上拍干。 8、如此重復(fù)4次（共洗板5次）。若使用自動(dòng)洗板機(jī)，請(qǐng)按洗板機(jī)操作程序進(jìn)行洗板，添加浸泡20s的程序，可以提高檢測(cè)的精度。洗板結(jié)束，加底物前，要在干凈不掉屑的紙上，充分拍干反應(yīng)板。 9、將底物A和B按1:1體積充分混合，所有孔中加入底物混合液100μL。用封板膜蓋住反應(yīng)板，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育15min。 10、所有孔加入終止液50μL，在酶標(biāo)儀上讀取各孔吸光度（OD值）。【檢驗(yàn)結(jié)果的解釋】檢測(cè)完成后，以標(biāo)準(zhǔn)品濃度做為縱坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)的吸光度（OD值）作為橫坐標(biāo)，利用計(jì)算機(jī)軟件，采用四參數(shù)Logistic曲線擬合（4-pl），創(chuàng)建標(biāo)準(zhǔn)曲線方程，通過樣本的吸光度（OD值），利用方程計(jì)算樣品的濃度值。如果樣品被稀釋，通過上述方法測(cè)的的濃度值，要乘以稀釋倍數(shù)，才是樣品的最終濃度。【檢驗(yàn)方法的局限性】 1、僅供科研使用，不得用于臨床診斷。 2、在試劑盒標(biāo)示的有效期內(nèi)使用，過期產(chǎn)品不得使用。 3、跟其他廠家的試劑盒或者組分不能混用。 4、使用試劑盒配套的樣品稀釋液。 5、如果樣本值高于最高標(biāo)準(zhǔn)品濃度值，請(qǐng)將樣本適當(dāng)稀釋后，再重新測(cè)定。 6、待測(cè)樣本中存在的人抗鼠等異嗜抗體會(huì)干擾檢測(cè)結(jié)果，檢測(cè)前，請(qǐng)排除該因素。 7、通過其他方法得到的檢測(cè)結(jié)果，與本試劑盒測(cè)定結(jié)果不具有直接的可比性。【產(chǎn)品性能指標(biāo)】 1、物理性能試劑盒的各液體組分應(yīng)澄清透明、無(wú)沉淀或者絮狀物。微孔板鋁箔袋應(yīng)真空包裝，無(wú)破損漏氣。 2、劑量反應(yīng)曲線線性校準(zhǔn)品劑量反應(yīng)曲線相關(guān)系數(shù)r值，大于等于0.9900。 3、精密度批內(nèi)精密度：三組已知的高、中、低濃度樣品，進(jìn)行二十次在同一個(gè)板塊內(nèi)精度評(píng)估。批內(nèi)變異系數(shù)CV%小于10%。批間精密度：三組已知的高、中、低濃度樣品，進(jìn)行二十次在不同板塊內(nèi)精度評(píng)估。批間變異系數(shù)CV%小于15%。 4、靈敏度最低檢出劑量小于0.7 pg/ml。 5、回收率三組已知的高、中、低濃度樣品，進(jìn)行五次回收率評(píng)估，回收率在85%-115%之間。 6、特異性本試劑盒識(shí)別天然和重組人表皮生長(zhǎng)因子（EGF），與結(jié)構(gòu)類似物無(wú)交叉。 7、穩(wěn)定性 2℃-8℃保存，有效期6個(gè)月。售后電話：13559590085

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