檢測認證人脈交流通訊錄
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植物脫氫酶(SDHA)測試盒操作流程:
1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;
3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。
4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。
6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。
優(yōu)點如下:
1、快速簡便:操作時間短,48-50T,可測40例樣本左右,96-100T,可測80例樣本左右;
2、取樣量微:常規(guī)操作取樣量50l, 酶標儀操作僅需5l即可檢測,部分試劑盒取樣多少請;
3、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放3個月有效;
4、再現(xiàn)性好:20倍稀釋線性仍然良好;
5、回收試驗: X =99%;
6、受外界影響因素小:干擾因素少,重復性強;
7、測試面廣:可測動物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養(yǎng)細胞以及細胞培養(yǎng)上清液等,部分試劑盒適用于檢測植物,歡迎
儀器:
1、分光光度計/酶標儀/生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
使用須知:
(1)請參照相關法規(guī)、文獻、MSDs等信息,理解并掌握好試劑的特性,再進行安全操作。
(2)通常購買試劑時一定要想到--次性用完。若估算不足有剩余的話,更加注意其他保管和管理。
(3)萬一-試劑操作者并非專業(yè)技術人員。必須在專業(yè)人士的指導監(jiān)督下進行操作。對于使用后的廢棄物,不要或者舊的試劑,應按照相關法律法規(guī)正當處理。
(4)購買后,請務必確認標簽上的注意事項;做好預防顛倒,摔壞的措施和管理體制;在使用前再次確認標簽上的注意事項,做好必要的安全對策;對沒有標明其危害特性、有害特性的,也要慎重地進行操作;必須帶好防護用具,小心翼翼進行操作。
生化試劑的種類與等級說明:
(1)免疫試劑包括抗體及抗血清、正常血清及補體、抗原、免疫組織化學研究用試劑、細胞培養(yǎng)用試劑、細胞分離試劑、凝膠內擴散法及電泳試劑等。
(2)基因工程用試劑包括基因表達與基因重組、人工合成蛋白、激素、核酸合成試劑、內切酶等。
(3)誘變劑和主要供測定工作場所與生活環(huán)境中的毒物質的致癌性與化學毒物的致突變性。
(4)工業(yè)用化學品包括試制開發(fā)的工業(yè)用化學品,有四千種以上,還在不斷增加。
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
紅細胞:需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。
植物脫氫酶(SDHA)測試盒
http://www.szruiqing.com/Products-37431697.html
https://www.chem17.com/st539318/product_37431697.html
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