Fluo-8 AM鈣離子熒光探針系列簡介
Fluo-8（Fluo-2 Medium Affinity），是目前zui亮的可見光激發(fā)波長Ca2+熒光探針，其熒光強(qiáng)度比Fluo-4強(qiáng)兩倍，比Fluo-3強(qiáng)四倍。Fluo-8具中等程度的Ca2+親和力，幾乎接近Fluo-3，F(xiàn)luo-4（Fluo-3:Kd=0.4μM、Fluo-4:Kd=0.36μM、Fluo-4:Kd=0.389μM），使用上幾乎同F(xiàn)luo-3和Fluo-4。Fluo-8不僅維持Fluo-3，F(xiàn)luo-4便捷的光譜檢測特性，與Ca2+結(jié)合后的zui大激發(fā)波長為490nm，zui射波長為514nm。而且具有改善的細(xì)胞載入和Ca2+響應(yīng)能力。Fluo-8加載具較弱的溫度依賴性，在室溫或37℃孵育皆染色良好，不像Fluo-3，F(xiàn)luo-4嚴(yán)格要求在37℃孵育，此特征使其更適用于HTS高通量篩選實驗。Fluo-8應(yīng)用廣泛，與許多細(xì)胞系和靶向樣本兼容，不會受配體或靶標(biāo)本身信號干擾。Fluo-8可通過激光共聚焦顯微鏡、流式細(xì)胞儀、熒光酶標(biāo)儀、熒光顯微鏡等來檢測胞內(nèi)鈣離子水平的變化。
可見光激發(fā)Ca2+熒光探針的優(yōu)勢：
與紫外光激發(fā)的熒光探針相比，如Fura-2和Indo-1，可見光激發(fā)Ca2+探針具有以下特點(diǎn)：
1）適用于大多數(shù)的激光共聚焦測鈣系統(tǒng)，包括共聚焦激發(fā)掃描顯微鏡以及流式細(xì)胞儀等。
2）具有更強(qiáng)的染料吸收性能，使得更低濃度的探針即可成功檢測Ca2+變化，從而降低對活細(xì)胞的光毒性。
3）Ca2+依賴性熒光強(qiáng)度增強(qiáng)，對Ca2+變化水平檢測敏感度更高。
4）降低樣品自熒光以及光散射的干擾。
5）兼容光激活探針以及UV-激發(fā)試劑，因此更方便于多參數(shù)檢測。
6）無光譜偏移。
Fluo-8,AM相比較于Fluo-3，F(xiàn)luo-4的優(yōu)勢：
1）目前zui亮的可見光激發(fā)波長Ca2+熒光探針，熒光強(qiáng)度是Fluo-4的兩倍，F(xiàn)luo-3的四倍；
2）熒光探針加載更靈活快速，室溫或37℃孵育染色效果好，不像Fluo-3、Fluo-4嚴(yán)格要求在37℃孵育；
3）維持Fluo-3、Fluo-4的檢測光譜特性，與Ca2+結(jié)合后的zui大激發(fā)波長為490nm，zui射波長為514nm。4）50μg小包裝供應(yīng)，使用方便，且能很好保證產(chǎn)品的穩(wěn)定性。
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