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上海卓康生物科技有限公司

檢測認證人脈交流通訊錄

代做實驗――MTT實驗服務(wù)

  • 這真不是您需要的產(chǎn)品?
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  • 用  途:
  • 代做實驗
    • 上海卓康以質(zhì)量為本,樹立“卓康質(zhì)量”是公司的發(fā)展目標。我們一直加倍努力,竭盡全力做到不辜負您的支持與信賴。同時公司也離不開廣大客戶的幫助支持,真誠邀請國內(nèi)外有實力的實驗室、生物技術(shù)公司合作,共同發(fā)展。 目前卓康提供的服務(wù)范圍包括:生物合成siRNA、shRNA的制備;轉(zhuǎn)錄編碼shRNA的DNAs、轉(zhuǎn)錄編碼shRNA的質(zhì)粒載體訂購;siRNA靶位的設(shè)計和實驗選擇分析;siRNA相關(guān)試劑和RNA技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品的代理銷售;重組病毒構(gòu)建包裝;基因蛋白表達、載體構(gòu)建、多克隆抗體和單克隆抗體制備;多種細胞學(xué)服務(wù);常用的分子生物學(xué)試劑、實驗儀器、實驗耗材銷售等。 卓康在分子生物學(xué)和免疫學(xué)實驗技術(shù),特別抗體制備技術(shù)方面同樣具有豐富經(jīng)驗,提供快速、優(yōu)質(zhì)、性價比高的實驗服務(wù)。 代做實驗――MTT實驗服務(wù) 技術(shù)原理: MTT比色法以活細胞代謝物還原劑3-(4,5-二甲基噻唑-2) –2,5-二苯基四氮唑嗅鹽,商品名為噻唑藍,簡稱MTT 。檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性的MTT還原成為難溶性的藍紫色結(jié)晶物甲臢(formazan)并沉積在細胞中,而死去的細胞無此功能。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細胞中的甲臢,利用酶聯(lián)免疫檢測儀測定490 nm波長處的光密度OD值,可以間接反映出活細胞數(shù)量。在一定范圍內(nèi),MTT結(jié)晶物形成的量與細胞數(shù)成正比。該方法已經(jīng)廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測,大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選,細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等。 服務(wù)內(nèi)容: 我們多用與轉(zhuǎn)染目的載體后MTT檢測細胞增值:通用設(shè)置時間點12h,24h,36h,48h,72h(時間點也可由客戶定) 組別設(shè)置:正常組,HK陰性對照組(主要是用來消除轉(zhuǎn)染試劑毒性的影響),目的載體組 實驗步驟: 1:接種細胞:接種細胞:用0.25%胰酶消化單層培養(yǎng)細胞,用完全培養(yǎng)液配成單層培養(yǎng)細胞懸液,以每孔103-104個細胞接種于96孔板中,每孔200vl;37度Co2箱陪養(yǎng)24h。 2:培養(yǎng)細胞:轉(zhuǎn)染目的載體后同一般培養(yǎng)條件,培養(yǎng)3-5天(可根據(jù)試驗?zāi)康暮鸵鬀Q定培養(yǎng)時間)。 3:呈色:培養(yǎng)3-5天后,每孔加MTT溶液(5mg/ml用PBS <ph=7.4>配)20ul. 繼續(xù)孵育4小時,終止培養(yǎng),小心吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)上清液,對于懸浮細胞需要離心后再吸棄孔內(nèi)培養(yǎng)上清液。每孔加150ul DMSO,振蕩10分鐘,使結(jié)晶物充分融解。 4:比色:選擇490nm波長,在酶聯(lián)免疫監(jiān)測儀上測定各孔光吸收值,記錄結(jié)果,以時間為橫坐標,吸光值為縱坐標繪制細胞生長曲線。 注意事項: (1)選擇適當?shù)募毎臃N濃度。 (2)避免血清干擾:一般選小于10%的胎牛血清的培養(yǎng)液進行試驗。在呈色后盡量吸盡孔內(nèi)殘余培養(yǎng)液。 (3)設(shè)空白對照:與試驗平行不加細胞只加培養(yǎng)液的空白對照。其他試驗步驟保持一致,最后比色以空白調(diào)零。 服務(wù)承諾: 1. 提供每組平均OD值詳細記錄 2. 由OD值繪制生長曲線及結(jié)果分析 服務(wù)價格: 具體價格根據(jù)客戶實驗而定 聯(lián)系電話:021-55660344,021-55063976 傳真:021-55063976 網(wǎng)址:www.elisabio.com 網(wǎng)址:www.antibodybio.com 聯(lián)系人:黃力,業(yè)務(wù)qq: 909447355 公司對外郵箱:sales@elisabio.com

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